近日，北京大学学者团队在JAMA子刊《JAMA Network Open》（医学一区top，IF=10.5）发表了一项仅每组约38例患者的2型糖尿病创新药临床试验成果，小样本研究如何征服顶刊？我们一起看看！

这篇文章题为：“Berberine Ursodeoxycholate for the Treatment of Type 2 Diabetes：A Randomized Clinical Trial”。旨在评估小檗碱熊脱氧胆酸盐（HTD1801）在饮食和运动控制不充分的T2D患者中的安全性和有效性。

研究结果表明，在这项安慰剂对照的随机临床试验中，HTD1801治疗可显著降低HbA1c水平，并改善关键的心代谢及肝脏指标，安全且耐受性良好。这些研究结果正在进行的Ⅲ期研究中进一步验证。

这项Ⅱ期双盲、安慰剂对照、为期12周的随机临床试验于2022年3月至2023年1月在中国进行。

研究对象为T2D患者，他们接受了至少8周的饮食和运动管理，糖化血红蛋白（HbA1c）水平在7.0%至10.5%之间，空腹血浆葡萄糖（FPG）水平低于250.5 mg/dL。

Ⅱ期临床试验三组样本量如何计算？

研究者假设安慰剂组的HbA1c变化为-0.4%，HTD1801两个计量组（500 mg组和1000 mg组）分别为-1.1%和-1.4%，合并标准差为1.1%，双侧α=0.05。

根据计算，81名患者可提供90%的统计功效以检测HTD1801 1000 mg组与安慰剂组之间的统计学差异（提供63%的统计功效以检测500 mg BID剂量组与安慰剂组之间的统计学差异）。考虑到约20%的脱落率，计划每组纳入33名患者，总计99名。

研究采用分层区组随机化，按肝脂含量和HbA1c基线水平进行分层，将患者1：1：1随机分配至：

• HTD1801 500 mg组（n=37）；

• HTD1801 1000 mg组（n=38）；

• 安慰剂组（n=38）

这篇文章是非常典型的干预前后差值作为主要疗效终点，进行重复测量数据分析的文章。基线数据收集后每4周随访一次，HbA1c水平在第8周和第12周测量。

所以，主要终点的设置也比较讲究，为基线至第12周HbA1c水平的变化。次要终点包括血糖、肝脏及心代谢参数。

HTD1801治疗显著降低HbA1c水平

研究结果表明，与安慰剂组相比，HTD1801各剂量组均表现出剂量依赖性的HbA1c水平显著下降。

第12周，相比于安慰剂组，500 mg组、1000 mg组HbA1c水平多降低了0.4%（P=0.04）和0.7%（P＜0.001）。

两种 HTD1801 剂量治疗组的 HbA1c 水平均在第 8 周显示改善，并持续改善至第 12 周，无达到平台期的迹象。

与 HbA1c 水平的降低一致，HTD1801 还改善了葡萄糖代谢和胰岛素抵抗的相关指标。

• 相较于安慰剂组，500 mg组和1000 mg组空腹血糖水平呈剂量依赖性下降，且HTD1801组从治疗第4周空腹血糖即有所下降，并持续至治疗第12周。

“一药三效”，降糖、降脂还护肝

低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和非高密度脂蛋白胆固醇（non-HDL-C）、甘油三酯水平：HTD1801 治疗可导致三者的剂量依赖性降低，这种降低从第 4 周开始，并持续至第 12 周；

谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和γ-谷氨酰转移酶（GGT）水平：HTD1801 组患者在第 4 周时即表现出的降低。

在 1000 mg 组，肝生化指标的改善趋势持续至第 12 周。所有治疗组在第 4 周时总胆红素水平均有所下降。

安全性方面，整体上HTD1801 的安全性可控，患者耐受性好。

总之，相比于安慰剂，HTD1801 可降低HbA1C水平、空腹血糖水平和餐后0.5h血糖水平，并有利于降脂，具有潜在肝脏益处。

老郑小评

所以，小样本≠低质量！严谨设计+高阶统计=顶刊通行证！这篇文章的重复测量资料的研究设计和统计分析也值得称赞！

首先，研究者采用分层随机化，按肝脂肪含量和HbA1c基线分层，组间均衡可比；

其次，主要终点采用重复测量混合效应模型进行分析，高效处理重复测量数据，以基线HbA1c水平变化为因变量，治疗组别、测量时间点及二者的交互作用作为自变量；

最后，在主要终点的敏感性分析中，缺失数据使用最后观察前进法（LOCF）处理，并使用协方差分析（ANCOVA）模型进行分析，双重验证结果稳健性。